大鼠脂肪间充质干细胞是来源于脂肪组织的干细胞，与其它成体干细胞一样具有自我更新和多向分化的能力。人和鼠的脂肪组织均可用于分离ADSCs，其中鼠脂肪组织通常取自腹股沟处脂肪垫。
大鼠脂肪间充质干细胞的实验步骤：
1、10天龄到4周龄大鼠1只，麻醉处死，75%乙醇浸泡消毒3~5min。无菌条件下切开腹股沟皮肤，暴露腹股沟脂肪垫。
2、钝性剥离脂肪组织，清洗并去除筋膜组织及小血管。将脂肪垫剪碎，转移至15mL离心管中。
3、加入3~4倍体积的0.1%I型胶原酶溶液，37℃水浴振荡约20min，直至细胞混合物成乳状浓稠液体。期间可吹打脂肪组织，辅助消化。
4、250×g，4℃，离心5min。注意离心机预冷至4℃。
5、小心吸去上层油脂，注意不要破坏位于下方的胶状沉淀。加人5mL*培养基，重悬沉淀，转移到新的离心管中，再次离心5min。
6、重复洗涤一次，吸去上清。
7、加入8mL*培养基重悬沉淀，转移至T25培养瓶中，置于37℃，5%CO2温箱中。
8、待细胞贴壁生长48h后初次观察、换液。
9、换液时通过弃去培养基，从而去除未贴壁的细胞。
10、以后每两天更换一次培养基，细胞汇合达80%-90%时，0.25%胰蛋白酶消化，按1:2或1:3比例首次传代。
大鼠脂肪间充质干细胞注意事项：
1、取材时应将组织清洗干净，仔细剥离去除血管和筋膜组织。
2、脂肪组织在剪碎的过程中不能研磨，以免破坏细胞。
3、消化完后的组织在离心前把离心机预冷，使细胞更好的与油脂分离。
4、用明胶或者胶原蛋白处理培养皿底壁，有利于细胞的贴壁生长。
更新时间：2022-08-18
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